表題番号：2000A-092 日付：2002/02/25
研究課題緑色硫黄細菌反応中心とこれにつながる電子伝達系
研究者所属（当時） 資格 氏名
（代表者） 教育 教授 桜井　英博
研究成果概要
　緑色硫黄細菌Chlorobium tepidumから４種のフェレドキシン（FdA-D）を精製した。これらのFdの吸収スペクトルは、いずれも４Fe-４S型の特徴を示し、385nmおよび280nmに吸収の極大を、305nmに肩を持っていた。同じ細菌から精製した反応中心粒子およびホウレンソウFNRの存在下で、これらのFdは高いNADP+還元活性を示し、それぞれのKmおよびVmaxを決定した。精製したFdのN末端アミノ酸配列分析から、FdCとFdDのものは同じで、合計３種の配列が得られた。この細菌からは３つのFd遺伝子の存在が示されており、ここに得られた３種のN末端アミノ酸配列はこれらに対応している。FdCとFdDがクロマトグラフィー的に異なる挙動を示す理由は、今のところ不明である。これまで緑色硫黄細菌のFdは極めて酸素感受性が高く、空気中では短時間のうちに失活すると報告されていたが、今回われわれが精製したChlorobium tepidumのFdは酸素に対して比較的抵抗性で、気相を空気、４℃で保存したとき６日間で10-15%しか失活しなかった。
　反応中心は電子受容体側に３種のFe-Sクラスターを結合している。これらのFe-Sクラスターの還元型それぞれと酸化型初発電子供与体P840+の間の電荷再結合速度を閃光分光法により測定した。
　Heliobacillus mobilisから２種の４Fe-４S型Fdを部分精製した。このうちの1つは極めて酸素感受性が高かったが、他はそれほど感受性が高くなかった。